纯氟油Fluo-Oil 135(氟（fú）油3M Novec HFE7500电子氟化液的（de）替代品（pǐn）)

Fluo-Oil 135（简称FO135） 是一种纯氟（fú）化油，可用于（yú）替（tì）换氟油3M Novec HFE7500电（diàn）子（zǐ）氟化液（yè）。 Fluo-Oil 135氟油的化学和物理化学性质与3M Novec HFE7500 相似，如下表所（suǒ）示:

优势

生物相容性、可（kě）重复性和稳（wěn）定性（xìng）。

如何使（shǐ）用？

氟油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表（biǎo）面活性剂或已经用（yòng）Fluo-Oil 135油（yóu）稀释的表面（miàn）活性剂。

（由（yóu）于（yú）FluoSurf Neat表（biǎo）面活性剂是（shì）一种PFPE-PEG结构（gòu）的（de）复杂高效纯表面活（huó）性剂，因为类似于PFPE-PEG结构的纯表面活性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两（liǎng）嵌段或三嵌（qiàn）段表面活性剂（jì），Surf 含氟表面活性剂等，基本上（shàng）都可以使用（yòng）纯氟（fú）油Fluo-Oil 135进行稀释。稀释的浓度从0.2%到12%之间。）

保（bǎo）存

室温下避光保存

安全（quán）注意事项

● 避免吸（xī）入、摄入（rù）和接触皮肤（fū）和眼睛

● 穿（chuān）戴耐化学腐蚀（shí）的个人防护装备

● 戴（dài）上合适的手套（tào）

● 穿合适的防护服

● 戴侧护罩的（de）安全眼镜

与3M HFE7500油产（chǎn）生（shēng）液滴（dī）性能的测（cè）试（shì）比较

分别用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化油稀释FluoSurf neat表面活性剂，得（dé）到4w/w%的质量浓度。

水滴产生或（huò）油包水液（yè）滴（dī）产（chǎn）生的两（liǎng）相流速：

油相流速为300μL/hr，水相（xiàng）流速为100μL/hr。

水相（xiàng）为PBS溶液（yè）或100μM荧（yíng）光素的（de）PBS溶（róng）液（用于（yú）测（cè）试液滴的泄（xiè）露）

倒置显微镜（jìng）观察和Image J软件分析。

一（yī）、液滴尺寸及其分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油（yóu）中，产生相（xiàng）似尺寸的水（shuǐ）滴。在既定流速参数下（xià），液滴的平均直径为110μm。液（yè）滴（dī）尺（chǐ）寸的CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油（yóu））。

二、液（yè）滴稳定性

大多（duō）数研（yán）究（jiū）团队使用液滴微流体（tǐ）进行细（xì）胞封装或 PCR 应用。 因此，需要通过 PCR 的加热循环（huán）以及在 37°C 下长期孵育来产生（shēng）稳定的液滴。 表面（miàn）活性剂的（de）选择至关（guān）重要（yào），但选（xuǎn）择油同样重要，以确保可重复的实验以（yǐ）及单（dān）分散液滴群的生成（chéng）和（hé）保存。

分别从三个（gè）方面测试液滴的稳（wěn）定性（xìng）：一是把（bǎ）液滴重新注（zhù）入到玻璃观察腔室内；二是经典的PCR热循环过程，循环过程30次，每次热循环为98°C运行10s, 50°C运行（háng）5s, 72°C运（yùn）行10s；三是置于37℃的培养箱内（nèi）放置3天。对1万个液滴（dī）进行（háng）分析。

无论是在 Novec™ HFE 7500 还是（shì） Fluo-Oil™ 135 中形成（chéng） FluoSurf™ 稳定的液滴，在（zài） PCR 加热循环后或在 37°C 孵育 3 天后，液（yè）滴平均尺（chǐ）寸在生成时保持不变（biàn） [约 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴种群仍然是单分散的。 根据统计分析，计算出在加热循环后，只有 5% 的整体（tǐ）液（yè）滴（dī）的大小与（yǔ）平均（jun1）初始液滴直径的差异超（chāo）过 10%。

将（jiāng）氟化油从 Novec™ HFE 7500 切（qiē）换到 Fluo-Oil™ 135 对液滴稳定性没（méi）有影（yǐng）响。

三（sān）、液滴内的分子（zǐ）滞留

基于液滴的化学或生化分析依赖于试剂在单个液滴中保（bǎo）持隔离（lí）。 泄漏到连续相（xiàng）和液（yè）滴之间的交（jiāo）换，即使很低，也会影响结果的完整（zhěng）性（xìng），因此，分（fèn）子保留是选择氟化油（yóu）时（shí）要（yào）考虑的重（chóng）要参数。 众（zhòng）所周知，氟（fú）化油会（huì）限（xiàn）制液滴之间的（de）分子交换，因（yīn）此应验（yàn）证切（qiē）换油（yóu）的影响。

同时生（shēng）成两种油包水乳液[“空”（负载 PBS）和“满（mǎn）”（负载荧光素）液滴]，一次使用 Novec™ HFE7500，然后使用（yòng） Fluo-Oil™ 135 作（zuò）为连续相。 两种（zhǒng）混合物（wù），每（měi）一种都包含两个（gè）种群，在 37°C 下孵育，并（bìng）在不同（tóng）的时间（jiān）点（diǎn）拍摄照片。 使用 ImageJ 软（ruǎn）件（jiàn）对（duì）液滴内荧光强度的演变进（jìn）行了统计定量分析。

上图显示了两（liǎng）个群体之（zhī）间平均荧光强度差（chà）异的演变（biàn）（染料加载和空液（yè）滴）以及在（zài）初始时间点和 48 小时（shí）后相关的荧光和明场图（tú）片。

在 24 小时的过（guò）程中（zhōng），两种氟化油产（chǎn）生的液滴中荧光素的泄（xiè）漏率相似（约 15% 泄漏），并（bìng）且在（zài） Fluo-Oil™ 135 中产生液滴的情况下（xià）保持恒定（dìng） 3 天。相反，在 24 小时后， Novec™ HFE7500 中液滴的泄漏继续减少并达到 30% 左右。 这种较长孵育时间的较差保留性能可归因于后（hòu）一种（zhǒng）油的粘度略低，加（jiā）速了液滴之间更快的分子交换。

结论

对（duì）于基于液滴的（de）微流（liú）体应用，从一（yī）种氟化油类型切换到（dào）另一（yī）种类（lèi）型可能会对微流体（tǐ）实验的过程产生（shēng）重大（dà）影响，尤其是对（duì）液滴的有效生成（chéng）产（chǎn）生重大影（yǐng）响。 在（zài）氟油3M Novec™ HFE7500电子氟（fú）化液 和 氟（fú）油Fluo-Oil™ 135 的情况下（xià），已（yǐ）证实更换这两种氟化油对（duì）实验（yàn）条件和结果没有影（yǐng）响。 当使用（yòng） Fluo-Oil™ 135 作为连（lián）续相时，甚至可以观察（chá）到荧光（guāng）素在液滴内的更好保留。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是用于液滴微（wēi）流（liú）体应用的3M Novec™ HFE7500 氟油 的有（yǒu）效替代品（pǐn）。